一起了解下高效液相色譜儀的數據處理方法
點擊次數：1390 更新時間：2022-12-29
高效液相色譜儀(HPLC)是應用高效液(ye)(ye)相(xiang)色(se)譜原(yuan)理，主要用于(yu)分(fen)析(xi)高沸點不易揮發的(de)、受熱不穩(wen)定的(de)和分(fen)子(zi)量(liang)大的(de)有(you)機化合(he)物的(de)儀器設備。它由儲液(ye)(ye)器、泵(beng)、進樣(yang)器、色(se)譜柱(zhu)(zhu)、檢測器、記(ji)錄儀等(deng)幾部(bu)分(fen)組(zu)(zu)成(cheng)。儲液(ye)(ye)器中的(de)流動(dong)(dong)(dong)相(xiang)被高壓泵(beng)打入(ru)系統(tong)，樣(yang)品(pin)溶(rong)液(ye)(ye)經(jing)進樣(yang)器進入(ru)流動(dong)(dong)(dong)相(xiang)，被流動(dong)(dong)(dong)相(xiang)載(zai)入(ru)色(se)譜柱(zhu)(zhu)(固定相(xiang)) 內，由于(yu)樣(yang)品(pin)溶(rong)液(ye)(ye)中的(de)各(ge)組(zu)(zu)分(fen)在兩(liang)相(xiang)中具有(you)不同的(de)分(fen)配(pei)系數，在兩(liang)相(xiang)中做相(xiang)對運動(dong)(dong)(dong)時(shi)，經(jing)過(guo)反復多次的(de)吸附(fu)- 解吸的(de)分(fen)配(pei)過(guo)程，各(ge)組(zu)(zu)分(fen)在移動(dong)(dong)(dong)速度(du)上產生(sheng)較大的(de)差別，被分(fen)離(li)成(cheng)單個組(zu)(zu)分(fen)依次從柱(zhu)(zhu)內流出，通(tong)過(guo)檢測器時(shi)，樣(yang)品(pin)濃(nong)度(du)被轉換成(cheng)電信號傳送到記(ji)錄儀，數據以(yi)圖譜形式打印出來(lai)。HPLC廣泛應用于(yu)生(sheng)命科(ke)學、食(shi)品(pin)科(ke)學、藥物研究(jiu)以(yi)及環(huan)境研究(jiu)中。
高效液相色譜(pu)儀的校正是(shi)通過分析制備的標準樣(yang)品來(lai)確定計算絕對(dui)組分濃度的響應系數的過程。
1.外標法(fa)：外標法(fa)是在空白樣(yang)(yang)(yang)品(pin)中加入一定(ding)量(liang)的(de)(de)標準物質作為對照樣(yang)(yang)(yang)品(pin)，與未知樣(yang)(yang)(yang)品(pin)同時進行樣(yang)(yang)(yang)品(pin)處理和檢測(ce)，并計(ji)算出被(bei)檢測(ce)成分的(de)(de)濃(nong)度的(de)(de)定(ding)量(liang)方法(fa)。根據對照品(pin)響應(ying)值與標準品(pin)濃(nong)度函數的(de)(de)關(guan)系，測(ce)定(ding)未知試(shi)樣(yang)(yang)(yang)中的(de)(de)成分。
2.內(nei)標法：內(nei)標法是將(jiang)一(yi)定重量的(de)(de)純物(wu)質作為內(nei)標物(wu)加入一(yi)定量的(de)(de)被測(ce)樣品混合(he)物(wu)中，對含有內(nei)標物(wu)的(de)(de)樣品進行(xing)高效液(ye)相色譜(pu)儀分(fen)析(xi)，測(ce)定峰(feng)面積和相對含量。分(fen)別測(ce)定內(nei)標物(wu)和受(shou)試物(wu)的(de)(de)有效校正(zheng)系(xi)數，并按公式計算受(shou)試物(wu)的(de)(de)含量。
兩種適(shi)合的(de)(de)(de)(de)數據(ju)處理方法的(de)(de)(de)(de)差別為高效液相色(se)譜儀(yi)：內(nei)部(bu)標(biao)準(zhun)方法是將標(biao)準(zhun)的(de)(de)(de)(de)標(biao)準(zhun)物(wu)質作為要求的(de)(de)(de)(de)內(nei)部(bu)條(tiao)(tiao)件，并以合適(shi)的(de)(de)(de)(de)操(cao)作條(tiao)(tiao)件對樣品(pin)(pin)進(jin)行(xing)嚴(yan)格(ge)的(de)(de)(de)(de)試驗(yan)和試驗(yan)結果(guo)的(de)(de)(de)(de)檢驗(yan)，但對樣品(pin)(pin)的(de)(de)(de)(de)準(zhun)確操(cao)作條(tiao)(tiao)件和試驗(yan)結果(guo)的(de)(de)(de)(de)分析必須(xu)是嚴(yan)格(ge)的(de)(de)(de)(de)，而對樣品(pin)(pin)的(de)(de)(de)(de)內(nei)部(bu)標(biao)準(zhun)則不需要對樣品(pin)(pin)進(jin)行(xing)嚴(yan)格(ge)的(de)(de)(de)(de)校正。
